关键词：外来小鼠 加快净化 方案选择
”，但在实际操作中，经常会出现净化方案选择错误的情况，导致净化时间过长。 净化方案第一考虑因素是外来小鼠是什么类型（Tg/KO/KI/CKO/CKI等）、后代用于什么目的，然后根据小鼠雌雄数量、Genotype来决定净化方式。现举例说明：
一、 外来小鼠是 xxx-KO或xxx-Cre小鼠（包括CreERT2类小鼠需要净化）： 1. 后代需要heter： 1) 欲净化小鼠只有♂： a) 1-2只：保险起见，建议和B6或xxx-flox等品系交配净化。 b) 3只及以上：杀1♂直接做IVF净化最快捷，相当于一次IVF扩繁。卵子来源可以同时是B6或xxx-flox等品系。 2) 欲净化小鼠只有♀： a) 1-2只：保险起见，建议和B6或xxx-flox等品系繁殖后，再根据后代性别和Genotype选择净化方案。 b) 3只及以上：超排1-3♀，和B6交配净化。但只杀1见栓♀取胚胎，做胚胎移植。其余继续交配繁殖。 3) 欲净化小鼠♀和♂都有： 因为要的后代是heter，可以单独超排♀和B6或xxx-flox等品系交配净化，或者杀1-2只♂做IVF净化，相当于一次IVF扩繁。
2. 后代需要xxx-KO或xxx-Cre homo： 1) 欲净化小鼠只有♂或♀单一性别：无法做到后代中有homo。 2) 欲净化小鼠♀和♂都有： a) 1-2只♂，1-2只♀：保险起见，建议繁殖后再根据后代数量选择净化方式。♀超排年龄可以是3-5周龄，所以可以考虑♀和父代IVF或交配净化，节约3-5周等待交配繁殖时间。 b) ♂数量为1-2只，3-4只及以上♀：超排1-3♀，品系内交配净化。♀≥5只，可以考虑做IVF净化。
二、 外来小鼠是 xxx-flox（包括CKI类小鼠需要净化）：
无论后代要求是heter还是homo，都推荐直接和B6或xxx-Cre等品系IVF净化，得到大量净化后的heter后再品系内交配得到homo，或者和xxx-Cre交配繁殖。 为了交配成homo，然后再用homo小鼠去做净化是最不推荐的，也是最耽误时间的。请同学们考虑。 1. 欲净化小鼠只有♂： 1) 1-2只：保险起见，建议和B6或xxx-Cre等品系交配净化。 2) 3只及以上：杀1♂直接做IVF净化最快捷，相当于一次IVF扩繁。卵子来源可以同时是B6或xxx-flox或xxx-Cre等多个品系。
2. 欲净化小鼠只有♀： 1) 1-2只：保险起见，建议和B6或xxx-flox等品系繁殖后，再根据后代性别和Genotype选择净化方案。 2) 3只及以上：超排1-3♀，和B6或xxx-flox交配净化。但只杀1见栓♀取胚胎，做胚胎移植。其余继续交配繁殖。
三、 外来小鼠是 多个基因修饰小鼠：
DKO，假如是double heter，homo不死亡，建议和B6或double heter做IVF净化，优先选择有一个基因是homo的小鼠。 TKO，也是类似策略。 建议多个基因修饰小鼠的复杂净化，和张静或者常在当面沟通。避免出现长时间无法净化的情况。
四、 注意事项： 1. 无论是交配净化还是IVF净化，所有用于超排的雌鼠♀，年龄要求不少于3只，年龄在3-5周或9周以上，避开6-8周龄激素不敏感期；雄鼠♂年龄最好在10周龄以上，8周龄可以尝试。 2. 向其他老师索求小鼠时，尽可能要3只雄鼠♂。 3. IVF净化时，尽可能考虑是否可以和IVF扩繁一并进行。IVF扩繁见链接：小鼠IVF快速大量扩繁服务优缺点介绍。 4. 小鼠进入清华大学实验动物中心后，第一件事是做Genotyping，验证Genotyping方案可行，确保小鼠Genotype正确。 5. 建议多个基因修饰小鼠的复杂净化，和张静或者常在当面沟通。避免出现长时间无法净化的情况。
