显微注射技术服务项目

将外源基因导入目的细胞中有多种技术方法,其中比较稳定高效的就是显微注射法。通过显微操作系统(图1),用针尖极细(小于0.5um)的玻璃注射针将外源基因片段直接注射到不同时期,如原核期、2cell期、囊胚期等胚胎或体细胞中,然后通过宿主基因组发生的重组、缺失、复制或者易位等现象使得外源基因嵌入宿主的染色体DNA内,实现宿主基因修饰。

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近几年,随着满足师生的不同需求,实验动物中心已经可以提供多种注射技术,实现多种目标(图2):

1.      原核/胞质注射

提供质粒DNA/RNA,注射到小鼠受精卵胚胎的原核或者胞质内,生产转基因小鼠,基因敲除小鼠,定点敲入小鼠或者其他基因修饰小鼠。

2.      小鼠胚胎干细胞(ES)相关注射

2.1.  囊胚注射

将经过处理的ES细胞注射到囊胚期胚胎内,生产嵌合体小鼠或者验证干细胞的功能研究等

2.2.  8-Cell期胚胎注射

将单个或者固定数量干细胞注射到胚胎内,进行细胞相关功能的研究。

2.3.  胚胎透明带注射

将干细胞注射到小鼠胚胎透明带内,得到干细胞组装胚胎。无小鼠胚胎细胞干扰,体内观察干细胞的发育。

3.      /类精子注射

通过显微操作系统将单个精子头注入到小鼠卵母细胞胞浆内,使卵子受精,体外培养到早期胚胎,再移植到代孕鼠体内并获得目的小鼠的技术,称为小鼠卵胞浆内单精子显微注射技术(Intracytoplasmic sperm injectionICSI)。 同时,平台可以进行类精子细胞的注射,获得类精子细胞后代,是转基因小鼠制作的新方法。

4.      体细胞注射

将大分子,类荧光颗粒,标记物等不能通过细胞转染进行细胞的物质,通过显微操作技术注射到体细胞胞质或者核内,研究体细胞相关功能和结构等。

5.      体外构建类囊胚注射

 

实验预约

发送预约邮件到zhang_jing@tsinghua.edu.cn,预约实验。因为显微注射比较特殊,需要沟通后,制定方案。